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顯微成像組件/模組

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光片(light sheet)顯微鏡模組

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靈活配置光片顯微鏡模組

所屬類別:科研/工業成像系統 ? 顯微成像組件/模組

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光片顯微鏡(light sheet microscope)模組


光片熒光成像顯微鏡(light sheet microscope)是一種快速而柔和的成像技術。該技術憑借優異的三維成像能力、分辨率、更低的光漂白性和光毒性被廣泛的用于生物醫學研究等領域

光片顯微鏡的(LSFM或SPIM)與傳統顯微鏡的不同在于激發光的照明方式,照明光路與探測光路垂直放置, 它的照明光是與一張與成像面平行的薄薄的光片,只有焦平面的樣品被照亮,而其上下的樣品不受影響。和傳統熒光照明方式相比,光片照明有如下優點:

缅甸锦利国际1)提高了圖像和背景的反差(Signal-to-Background Ratio) 和軸向分辨率:光片照明技術保證了焦平面上下的樣品不會被激發,具備和共聚焦顯微鏡類似的光學切片功能;

2)減少了光漂白和光毒性:與傳統的熒光照明技術相比,光毒性可以被降低20-100倍,這樣,我們就能在更接近生理狀態的條件下,對活體生物樣品進行長時間的三維成像;

3)與激光共聚焦和雙光子顯微鏡使用低QE的PMT的點掃描成像相比,光片顯微鏡使用高QE的CCD或sCMOS相機進行面成像,大大提高了成像速度和圖像的信噪比。共聚焦需要幾分鐘甚至幾小時才能拍完的樣品,用光片顯微鏡只需要幾秒到幾分鐘。因此,光片顯微鏡也特別適合用于大樣品成像。

在多數光片系統中,光學元件是固定的,需要移動樣品 (或使光片從xyz方向掃過樣品) 來獲得完整的3D圖像。通過移動或旋轉樣品,可以對大樣品進行成像,并從多個角度拍攝,將這些多視角圖像通過特別算法融合在一起后,能夠進一步提高圖像分辨率,并修正一些光片技術特有的缺陷。

光片顯微鏡的搭建的主要困難在于各個組件的同步,例如相機和平移臺,激光和光片的產生等。為了方便客戶自主搭建該設備,上海昊量光電設備有限公司推出了光片顯微鏡模塊組件,客戶只需按照自己的需求購買激光激發光源,相機就可完成該系統的搭建,如有需要錢也提供整套解決方案。昊量光電推出的模塊主要包塊一下幾款產品:

缅甸锦利国际1)雙向倒置光片顯微鏡模塊(DISPIM)

DISPIM是一款靈活的易于安裝的光片顯微鏡組件,該組件安裝到倒置顯微鏡上時可實現雙向觀測。該組件兩個物鏡垂直放置在開放式培養皿的樣品上方,物鏡與垂直方向成45°。該組件可以放置在常規倒置顯微鏡的頂部,也可安裝在我們提供的RAMM/MIM框架組件上。

                        

該組件有兩種配置:

①單面系統(iSPIM)

該系統一個物鏡通過常規的振鏡產生移動光片,使光片穿過樣品,通過振鏡移動光片同時移動壓電物鏡掃描臺完成3D成像。該系統圖像獲取樣品迅速,低成本,但是軸向分辨率低于XY平面分辨率。

②雙面系統(diSPIM)

在該系統中兩邊都包含光片掃描儀、壓電物鏡掃描臺和相機,在實驗中兩個物鏡交替用于照明和檢測,同時在正交方向獲得樣品的圖像,并且將兩個方向的收集的數據集進行計算合并生成各向同性的3D圖,如果實驗需要也可以單面模式運行。該模塊XY&Z軸都具有較好的分辨率,但是需要購置更多的硬件,且后期需要更多的圖像處理。

2)透明組織專用光片顯微鏡(ct-SPIM)

缅甸锦利国际該光片顯微鏡的外形結構與diSPIM/iSPIM結構類似,但是不包括倒置顯微鏡。該系統配置經過優化可對透明組織進行成像。樣品放置在電動XYZ平臺上,由于樣品尺寸較大,平臺掃描是其成像的唯一可行方式。采集速度受相機幀頻限制。該模塊也是擁有兩種不同配置,即單面成像和雙面成像系統。

3)傾斜單面光片顯微鏡(OSPIM)

OSPIM系統是一個單面光片系統,上面物鏡以60°傾角安裝在RAMM框架上,底測顯微鏡物鏡用于產生光片,該平臺可以安裝在商業上的倒置顯微鏡上。

                           

此外還提供了搭建光片顯微鏡中常用的模組,

1)光纖耦合激光掃描儀

光纖耦合激光掃描儀是一款緊湊而通用的2D掃描單元。設計適用于生成SPIM光片。用戶提供的光束通過標準光纖連接器進入掃描儀,通過二維MEMS掃描鏡掃描成光片。掃描儀通常使用C型接口連接到顯微鏡上。

2)多重浸漬物鏡

該物鏡主要設計用于光片顯微鏡檢查透明組織樣品。由于物鏡具有獨特的第 一彎曲表面,因此物鏡可以在沒有任何校正環的情況下工作在任何折射率的介質中。物鏡可以浸入到苛刻的介質,例如DBE和BABB。



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